新生大鼠原代小胶质细胞分离培养方法的改良

目的研究改良体外小胶质细胞分离培养的方法及效果。传统法存在动物用量大、成本高且细胞培养时间长等局限。方法结合消化试剂组合和手摇震荡法培养分离小胶质细胞;同时采用Iba-1免疫荧光法进行细胞鉴定和纯度分析,台盼蓝染料法进行活力检测以及脂多糖刺激比较不同状态的小胶质细胞。结果改良法可在4 d内稳定获得小胶质细胞 1. 0×10~6个/60 mm培养皿,纯度≥98%,活力 98%,较传统法在动物用量、总成本和培养时间分别减少了2、3. 2、1. 5倍。结论改良法可减少动物用量、降低成本,缩短细胞培养时间;为研究小胶质细胞的生物学功能和中枢神经系统疾病机制建立了一种稳定、简便、高效的细胞模型。     

肝移植术后免疫耐受相关研究进展

肝移植是目前公认的治疗终末期肝病的最有效措施,而如何让移植受者获得免疫耐受状态则是肝移植科医师追求的最终目标。了解最新的国际多中心临床经验以及相关基础研究结果,有助于我们更深入地认识免疫耐受,从而为移植受者制定更加妥善的治疗方案。本文综合国际核心期刊报道的内容,从临床免疫耐受的可行性、免疫耐受的诱导和维持、免疫耐受诱导方案的制定及寻找合理的免疫状态的相关监测指标等方面作一综述,并对今后的研究方向作出展望。     

Immutol诱导大鼠心脏移植物免疫耐受的研究

目的探讨Immutol诱导大鼠心脏移植物产生免疫耐受的作用。方法建立大鼠腹腔异位心脏移植模型。将受体大鼠分成5组:空白对照组(n=6);DMSO组(n=6),使用二甲基亚砜(DMSO)给药至移植物停搏;Immutol组(n=6),使用Immutol给药至移植物停搏;环孢素(CsA)组(n=10),使用CsA给药20 d后停药;联合实验组(n=13),使用Immutol给药60 d后停药,CsA给药20 d后停药。观察各组大鼠心脏移植物的存活时间和病理学变化;检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-10、干扰素(IFN)-γ的含量,以及心脏组织的吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、纤维蛋白原样蛋白2(Fgl2)的信使核糖核酸(mRNA)表达情况。结果联合实验组心脏移植物可长期存活,存活时间180 d,均可诱导产生免疫耐受。联合实验组术后39 d心脏移植物的病理评分明显低于CsA组(P0.05)。联合实验组术后9、39 d血清IL-10和IFN-γ含量均明显高于CsA组(均为P0.05),联合实验组IL-10和IFN-γ含量随时间延长逐渐升高。联合实验组术后39 d IDO和Fgl2 mRNA表达量明显高于CsA组(均为P0.05),联合实验组术后IDO的mRNA表达量呈现逐渐升高的趋势。联合实验组术后180 d Fgl2的mRNA表达量明显高于术后9、39 d(均为P0.05)。结论 Immutol联合CsA可有效抑制急性排斥反应发生,停药后可诱导移植物长期存活,产生免疫耐受。     

贝克曼CX4常见故障及其解决办法

故障一：样品条码扫描系统故障。正常情况下，在仪器Standby状态，按下Start键后，样品条码扫描系统就会发出红光。问题之一，Start键后，条码扫描仪暂时亮，样本通过转盘转入后红灯灭，无法扫描；问题之二，启动后条码扫描仪就没有反应，红灯不亮。     

真菌源性CD::UPRT联合基因治疗脑胶质瘤的实验研究

目的研究5-FC/CD：：UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6的杀伤效应。方法扩增yCD：：UPRT融合基因并构建含yCD：：UPRT基因的重组表达载体；载体转染包装细胞PT67,所获重组病毒转染胶质瘤细胞C6,筛选并鉴定阳性转基因克隆；用MTT法检测不同浓度5-FC对CD：：UPRT转基因细胞的杀伤效应。结果PCR法扩增出全长CD：：UPRT基因,经测序证实序列正确,重组逆转录病毒表达载体pLXSN-yCD：：UPRT经双酶切获目的条带,载体转染包装细胞获重组逆转录病毒(滴度达3．5×10~6CFU/ml)并转染C6,经筛选获得转基因阳性克隆C6-yCD：：UPRT细胞株,检测显示该细胞株有效表达目的基因。当5-FC终浓度≥10μmol/L时,实验组与对照组的细胞增殖力出现显著差异(P＜0．01),5-FC作用96h后电镜观察到凋亡小体。结论5-FC/yCD：：UPRT联合基因治疗策略对胶质瘤细胞C6有明显的杀伤作用。     

己酮可可碱预处理对大鼠供肝冷缺血损伤影响的实验研究

目的　探讨已酮可可碱预处理供者及肝脏对供肝冷缺血损伤的影响。方法　Wistar大鼠按处理方法的不同分为 4组 :对照组、供者预处理组 (实验 1组 )、供肝预处理组 (实验 2组 )、供者及供肝联合预处理组 (实验 3组 ) ,预处理使用己酮可可碱。各组动物均在供肝冷保存 6h后行原位肝移植 ,门静脉血流恢复后第 30min、3h及 2 4h取门静脉血测定肿瘤坏死因子 (TNF α)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)及谷胱甘肽S转移酶 (GST)的水平。结果　门静脉复流后 30min、3h时血清TNF α水平 ,各实验组明显低于对照组 ,实验 3组显著低于实验 1组及实验 2组 (P <0 .0 5) ;30min及 3h时血清GST水平 ,各实验组明显低于对照组 (P <0 .0 5) ,实验 3组显著低于实验 1组及实验 2组 (P <0 .0 5) ;30min及 3h时血清ALT水平 ,各实验组明显低于对照组 ,实验 3组显著低于实验1组及实验 2组 (P <0 .0 5) ;2 4h时前述各指标各实验组明显低于对照组 ,实验 3组显著低于实验 2组 (P <0 .0 5) ;30min时血清AST水平 ,各实验组明显低于对照组 ,实验 3组显著低于实验 1组及实验 2组 (P <0 .0 5)。结论　己酮可可碱预处理对供肝的冷缺血再灌注损伤有一定的保护作用     

严重多发伤的处理体会

目的探讨严重多发伤的处理原则及方法。方法回顾分析近10年来收治的76例严重多发伤病人的救治情况。结果76例病人都得到了及时救治,先后都实施了不同类型的手术治疗。死亡7例,术后并发症7例。结论严重多发伤在基层医院经常遇到,重视院前救护,规范入院后的处理程序,强调术中的治疗原则及治疗过程的注意点,对提高救治成功率十分重要。     

远程医疗会诊车应用情况及改进建议

介绍了远程医疗会诊车的性能特点、使用方法、功能及应用范围并提出了改进建议。     

小儿感染性多神经根炎30例临床分析

我科1978年12月～1988年12月共收治40例小儿感染性多神经根炎。本文就资料较完整的30例分析如下。临床资料一般资料男20例,女10例,男∶女为2∶1。年龄8月～3岁8例,～7岁12